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如何選擇優(yōu)質(zhì)胎牛血清?

  • 品牌:

  • 型號:

  • 規(guī)格:

  血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、 多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質(zhì)對促進 細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。

  胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。

  顯然,胎牛血清是品質(zhì)最高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。

  胎牛血清 產(chǎn)品描述:

  1、胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質(zhì)對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。

  2、胎牛血清在細胞培養(yǎng)方面通常優(yōu)于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界, 與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養(yǎng)細胞發(fā)生交叉反應(yīng)的風險也較低,是理想的細胞生長補充劑。

  胎牛血清 功能:

  1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。

  2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。

  3.有些情況下 結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和 熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。

  4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。

  5.起酸堿度 緩沖液作用。

  6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。

  -20℃,避光。

  在選擇血清時,應(yīng)格外留意篩選內(nèi)毒素:

  1.養(yǎng)干細胞時,干細胞對內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時,干細胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過提早審核該批次《檢測報告》,以決定是否入圍進行試用。2.養(yǎng)免疫細胞時,過高的內(nèi)毒素可誘導免疫細胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細胞集落的形成等。3.基因敲除相關(guān)的細胞實驗,培養(yǎng)的細胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導細胞衰老或凋亡的試劑,都會讓后續(xù)的實驗結(jié)果“失之毫厘,謬以千里”。在準備血清和其他試劑時,選擇極低的內(nèi)毒素(最好≤1EU/ml),對實驗至關(guān)重要;4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細胞轉(zhuǎn)染,或者肝細胞、神經(jīng)細胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細胞的擴增,這些都需要挑選好的血清給細胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實驗順利的第一步。5.實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)常或長時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。 總之,血清中內(nèi)毒素含量過高,更容易導致細胞“亞健康”,造成數(shù)據(jù)不準,或細胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導致試驗中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。

  內(nèi)毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎牛血清為例:

  當血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;

  當血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優(yōu)級胎牛血清;

  當血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時,此血清為標準級胎牛血清。

  儲存條件:

  -20°C凍存。

  胎牛血清首次解凍后,應(yīng)按單次習慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。

  若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。

  為保證細胞培養(yǎng)的最佳效果,血清和培養(yǎng)基的配置,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。

  血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。

  胎牛血清 使用說明:

  血清從-20℃取出后,融化,按推薦體積加入到基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,混勻,制備成新鮮完全培養(yǎng)基。(整個操作需在無菌超凈臺中進行,注意無菌操作。)

  關(guān)于熱滅活:胎牛血清不推薦熱滅活。

  熱滅活一般是指在做免疫相關(guān)的試驗中,通過加熱滅活掉血清中的補體,以避免對免疫試驗的影響。在胎牛血清中,由于胎齡原因,尚未形成完整的補體系統(tǒng),因此,胎牛血清不會真正干預(yù)免疫試驗。故不需滅活。并且,熱滅活反而可能導致胎牛血清中部分重要的生長因子的活性衰減,進而影響細胞培養(yǎng)效果。若針對某些特殊試驗,對于胎牛血清一定要做熱滅活,國際上推薦熱滅活的方法:40℃水浴,20min。


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